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细菌形态的观察
一、实验目的和内容
目的：巩固油镜的使用；掌握细菌形态观察的基本方法，了解细菌的基本形态。
内容：1．观察细菌的基本形态染色装片。
2．观察枯草芽孢杆菌活菌。
3．观察细菌细胞结构的染色装片。
二、实验材料和用具
溶血链球菌(Streptococcus haemolyticus )、棒杆菌(Corymebacterium)、螺菌(Spirillum)、浮游球衣菌(Sphaerotilus natans)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium )、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis )、普通变形菌(Proteus vulgaris)、丙酮丁醇梭菌(Clostridum acetotylicum)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum )等细菌的染色装片，枯草芽泡杆菌(Bacillus subis)的斜面菌种。
香柏油、二甲苯、无菌水；
显微镜、擦镜纸、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸水纸、小滴管。
三、操作步骤
(一)观察细菌的基本形态
用低倍镜、高倍镜和油镜观察溶血链球菌、棒杆菌、螺菌、浮游球衣菌的染色装片，并分别在油镜下绘图。
(二)观察细菌的细胞结构
用低倍镜、高倍镜和油镜观察巨大芽孢杆菌(示细胞壁)、巨大芽孢杆菌(示异染粒)、苏云金芽孢杆菌(示伴胞晶体)、普通变形菌(示鞭毛)、丙酮丁醇梭菌(示芽孢)、褐球固氮菌(示荚膜)等细菌的染色装片，并分别在油镜下绘图。
(三)观察枯草杆菌活菌，常用压滴法观察。
1．将洁净无油腻的载片放于自己右边前方，在中央放一小滴无菌水。
2．将酒精灯放于自己正前方，点燃。
3．用无菌操作方法从枯草芽孢杆菌斜面中沾取少量菌体，与载片上的水滴充分混匀，把接种环上残留的菌体杀灭后，放回试管架。
4．用镊子夹一洁净的盖玻片，使其一边先接触菌液，然后将整个盖玻片慢慢放下，注意不要产生气泡。如菌液过多，可用吸水纸适当吸去一部分。
5．先用低倍镜然后转用高倍镜观察，观察时光线要适当调暗些。
四、注意事项
1．注意擦镜头时，只能用擦镜纸。
2，观察完毕，必须将镜筒上升，才能取下装片，放入另一装片后，要按使用油镜要求，重新操作，不能在油镜下直接取下和替换装片，切记！
3．无菌操作过程中，接种环灭菌后不能触及其他物品，挑菌不能过多。
五、实验报告
(一)绘图
l．给出你所观察到的几种细菌的个体形态视野图。
2．给出你所观察到的细菌细胞结构视野图，并注明各部分。
(二)试指出在制备活菌装片时，应注意什么问题?
七、问题和思考
1．用明视野显微镜观察细菌的形态时，你认为用染色装片好，还是用非染色的活体装片好，为什么?观察活体装片与染色装片，光线调节各有什么不同?
2．无菌操作过程中，可否将棉塞放在桌面上?为什么?
3试设计一个准备本实验的工作方案。
如何用显微镜观察细菌的形态结构
实验 细菌形态的观察
一、实验目的
1.认识细菌的基本形态。
2.学习并掌握细菌压滴片及悬滴片的制作方法。
二、实验原理
1.压滴法将细菌悬液滴于载玻片中央，加上盖玻片，置于显微镜下观察。此法是研究微生物形态最简单、最基本的方法之一。
2.悬滴法将细菌悬液滴于盖玻片中央，翻转，置于凹玻片的凹窝中央，由于细菌不受盖玻片的压力影响，所以此法常用于观察并区别细菌运动的方式，也可观察细菌的繁殖方式及孢子萌发等。
3.利用暗视野显微镜形成黑暗背景、被检物构成亮点的特性，可进行细菌运动方式的观察。
三、实验材料和用具
1.菌种 金**葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)
大肠杆菌 (Escherichia coli)
普通变形杆菌 (Proleus vulgaris)
枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)
黏质沙雷氏菌 (Serratia marcescens)
细菌三种基本形态的染色片
2.用具 显微镜、载玻片、凹玻片、接种环、纱布、镜头纸、镊子、盖玻片、特种铅笔、无菌水、凡士林、火柴、酒精灯、玻片架、香柏油、二甲苯等，722s型分光光度计，0.85％NaCl溶液。
四、实验方法
1.压滴标本制作
①取—清洁载玻片，放在酒精灯的右侧桌面上，用记号笔在玻片右侧注明观察菌体的名称。
②点燃酒精灯，取一小滴清洁的无菌水置于玻片中央。
③用无菌操作取出少许菌苔，于玻片水中，涂匀(见图2-1)。
④用镊子取清洁的盖玻片。由一端与玻片的菌液接触，徐徐放下盖玻片，注意避免产生气泡。
⑤将压滴标本放于显微镜下观察（图2-2）。
2.悬滴标本制作
①取清洁的凹玻片和盖玻片各一片 [图2-3 (a)、(b)]；
②用火柴杆取少许凡士林涂于盖玻片的四角；
③在盖玻片中央用接种环蘸取一小滴无菌水，然后用无菌操作取少许菌苔在水滴上轻沾一下，注意水滴大小要适宜，放菌苔时不要使水滴破散；
④将凹玻片翻转向下，使凹窝中央对准盖玻片中央液滴，然后轻压。使凹玻片与盖玻片粘合紧密，以免蒸发，然后很快将凹玻片翻转，使盖片向上 [图2-3 (c)、(d)]。
⑤将制作好的悬滴片置于显微镜下观察。
虽然各种类型的显微镜能够观察到细菌的各种形态结构，但一般实验室常用的是普通光学显微镜.由于细菌体积小且透明，在活体细胞内又含有大量的水分，因此，对光线的吸收和反射与水溶液相差不大.当把细菌悬浮在水滴内。
放在显微镜下观察时，由于与周围背景没有显著的明暗差，难于看清它们的形状，更谈不上识别其细微结构。
而经过染色，就可借助颜色的反衬作用比较清楚地看到菌体形态，亦即菌体表面及内部结构着色与背景形成鲜明对比，这样便可在普通光学显微镜下清晰地观察到微生物的形状和结构，而且还可以通过不同的染色反应来鉴别微生物的类型和区分死、活细菌等，因此，染色技术是观察细菌形态结构的重要手段。
扩展资料：
显微镜使用注意事项：
1，持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势，不可单手提取，以免零件脱落或碰撞到其它地方。
2，轻拿轻放，不可把显微镜放置在实验台的边缘，应放在距边缘10cm处，以免碰翻落地。
3，保持显微镜的清洁，光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，机械部分用布擦拭。
4，水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台，如果沾污应立即用擦镜纸擦净。
5，放置玻片标本时要对准通光孔中央，且不能反放玻片，防止压坏玻片或碰坏物镜。
6，要养成两眼同时睁开观察的习惯，以左眼观察视野，右眼用以绘图。
7，不要随意取下目镜，以防止尘土落入物镜，也不要任意拆卸各种零件，以防损坏。
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